Comparison of Different Extraction Methods for Transgenic Rice Seed Nucleic Acids

doi:10.3969/j.issn.1006-8082.2011.06.012

›› 2011, Vol. 17 ›› Issue (6): 40-43.DOI: 10.3969/j.issn.1006-8082.2011.06.012

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Comparison of Different Extraction Methods for Transgenic Rice Seed Nucleic Acids

Online:2011-11-20 Published:2011-11-20

转基因水稻种子核酸提取方法的比较研究

1 中国计量科学研究院，北京 100013；2 中国计量学院，浙江杭州 310018

通讯作者: 王晶
基金资助:
国家转基因生物新品种培育科技重大专项课题（No.2008ZX08012003）；国家科技支撑计划项目课题（No.2008BAK41B01）

Abstract

摘要： 以转基因水稻克螟稻2号及其受体水稻秀水11的种子为试验材料，将水稻种子脱壳磨成粉末后，称取100mg粉末分别用传统CTAB法和5种核酸提取试剂盒进行水稻基因组DNA的提取，其中试剂盒A和试剂盒B为磁珠法，其余为硅胶过柱法，将提取的基因组DNA通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、荧光定量PCR等3种检测方法比较其提取效果，并结合提取时间和提取成本的比较，以期找到性价比最佳的提取方法。结果表明，试剂盒A和试剂盒B提取的基因组DNA完整性最好、纯度和提取效率最高，综合提取效果、耗时及成本等因素考虑，试剂盒B的性价比最佳。本研究为转基因水稻种子的检测和研究奠定了基础。

关键词: 转基因水稻, 基因组DNA, 荧光定量PCR扩增, 核酸提取效果

CLC Number:

S511.3

SUI Zhi-Wei-1. Comparison of Different Extraction Methods for Transgenic Rice Seed Nucleic Acids[J]. , 2011, 17(6): 40-43.

隋志伟1，#,余笑波2，# ,王晶1，*,李亮1臧超1,叶子弘2. 转基因水稻种子核酸提取方法的比较研究[J]. 中国稻米, 2011, 17(6): 40-43.

References

[1] 盖钧镒. 作物育种学各论[M]. 北京：中国农业出版社，2006：27-33.

[2] 宋尚新，肖红梅，高峰，等. 邱良焱转基因稻米DNA提取方法的比较研究[J]. 食品科学，2010，31（22）：445-449.

[3] 张亮，杨剑波，宋丰顺，等. 实时荧光PCR技术定量检测转Bt基因水稻的研究[J]. 生物学杂志，2008，25（6）：63-71.

[4] 赵怡，陈苏红，刘志红，等. 6种核酸提取试剂盒对甲型H1N1流感病毒核酸提取效果的比较[J]. 军事医学科学院院刊，2010，34（2）：111-4.

[5] 韩玉杰，贾炜珑，王自霞，等. 几种提取植物DNA方法的比较[J]. 山西农业科学，2008，36（7）：17-19.

[6] 周延清. DNA分子标记技术在植物研究中的应用[M]. 北京：化学工业出版社，2005，17（3）：241-245.

[7] 袁云香，李海娟. 水稻基因组DNA提取方法的研究进展[J]. 湖北农业科学，2009，49（4）：968-971.

[8] 易庆平, 罗正荣, 张青林. 植物总基因组DNA提取纯化方法综述[J]. 安徽农业科学，2007，35（25）：7789-7791.

[9] 盖钧镒. 作物育种学各论[M]. 北京：中国农业出版社，2006：27-33.

[10] Liu D，Jie S，Yang L T，et al. Evaluation of the impacts of different nuclear DNA content in the hull, endosperm, and embryo of rice seeds on GM rice quantification[J]. J Agric Food Chem，2010，58: 4582-4587.

[11] 胡瑞波，范成明，傅永福. 植物实时荧光定量PCR内参基因的选择[J]. 中国农业科技导报，2009，11（6）：30-36.

[12] 李钱峰，蒋美艳，于恒秀，等. 水稻胚乳RNA定量 RT-PCR分析中参照基因选择[J]. 扬州大学学报：农业与生命科学版，2008，29（2）：61-66.

[13] Jeong S C，Pack I S，Cho E Y，et al. Molecular analysis and quantitative detection of a transgenic rice line expressing a bifunctional fusion TPSP[J]. Food Control，2007，18（11）：1434-1442.

[14] 宋敏，张云孙，胡卫红. 4种提取水稻基因组DNA方法的比较[J]. 云南大学学报：自然科学版，2001，23（1）：74-76.

[15] 高秋月，景奉香，李海燕，等. 基于磁珠的细菌基因组DNA快速提取方法[J]. 安徽农业科学，2010，38（21）：11071-11074.

[16] 谢欣，张旭，高华方，等. 基于多功能纳米磁珠的DNA制备与基因分离[J]. 科学通报，2004，49（6）：541-543.

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[1]	. Analysis on Characteristics of Rice Varieties Registered in China in 2014 [J]. , 2015, 21(6): 7-12.
[2]	LIN Hai, PANG Qian-Lin, WANG Zhi-Gang, E Zhi-Guo. Analysis on Quality Traits and Yield of Rice Varieties Approved in China in 2013 [J]. , 2014, 20(4): 33-37.
[3]	LIN Hai, PANG Qian-Lin-*, WANG Zhi-Gang, E Zhi-Guo. Analysis on Yields and Quality of Rice Varieties Registered in China in 2011 [J]. , 2012, 18(5): 8-11.
[4]	LI Chun-Sheng, ZHANG Xiao-Hui, MAO Yi-Jian, KONG Xian-Qin, ZHANG Ke-Qin. Actuality and Trend of Markets on Hybrid Rice Seed [J]. , 2011, 17(6): 6-10.
[5]	LIN Hai, Pang-Qian-Lin, Ruan-Liu-Qing, Wang-Zhi-Gang, E-Zhi-Guo. Analysis on Yield and Quality Characteristics of Rice Varieties Registered by State and Province （Municipality） in 2010 [J]. , 2011, 17(6): 59-62.